Communication

Caractérisation d'oxyde nitrique synthase bactériennes

Jérôme Lang

Membre a labase

Jérôme Lang

Résumé de la communication

L’oxyde nitrique synthase (NOS) est une protéine de type hème-thiolate, c’est-à-dire que l’atome de fer de l’hème est coordonné à un atome de soufre, qui provient d’une cystéine chez les NOS. En présence de l’acide aminé L-arginine, d’oxygène et du cofacteur (6R)–5,6,7,8-tétrahydrobioptérine (H[SUB 4]B), l’enzyme catalyse la formation d’oxyde nitrique (NO) et de citrulline en deux étapes d’oxydations séquentielles. Cependant, le mécanisme d’action des NOS soulève encore à ce jour plusieurs interrogations étant donné qu’il est très complexe. Également, les interactions entre l’oxygène et les substrats (L-arginine et N[SUP G]-hydroxy-L-arginine) dans la poche distale de l’enzyme soulèvent aussi beaucoup de questions étant donné que la catalyse chez les NOS est rapide, ce qui rend les complexes oxygénés très difficiles à caractériser. Notre recherche consiste à répondre et éclaircir ces interrogations chez les NOS en caractérisant les complexes oxygénés de l’oxyde nitrique synthase de ''Staphylococcus aureus'' (saNOS) en spectroscopie optique et résonance Raman. Plusieurs moyens seront utilisés pour arriver à notre but, notamment l’utilisation de substrats non naturels des NOS et la mutation de deux acides aminés clefs du site actif, soit le tryptophane 56 et la glycine 224. Les résultats préliminaires de ces expériences seront abordés et mis en perspective avec le mécanisme catalytique actuel proposé pour l’oxyde nitrique synthase afin mieux comprendre son fonctionnement.