Communication

Addition d’un épitope exogène à la capside du réovirus de mammifères

Virginie Brochu Lafontaine

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Virginie Brochu Lafontaine

Résumé de la communication

Le réovirus de mammifères est actuellement à l’étude comme virus oncolytique et alternative à la chimiothérapie dans le traitement de certains cancers. Bien que naturellement peu pathogène chez l’humain, l'ajout d'une molécule de ciblage au virus permettrait d’optimiser ses propriétés oncolytiques. La récente adaptation de la technique de génétique inverse aux virus à génome d’ARN bicaténaire nous permet d’envisager cette possibilité. Afin d’examiner la faisabilité de cette approche, l’épitope 6-histidines fut ajouté par mutagenèse dirigée à ce qui correspond à l'extrémité COOH de la protéine d’attachement du virus; la protéine σ1 codée par le gène S1. Le virus portant l'épitope fut récupéré par transfection de cellules BHK-T7 en utilisant 9 plasmides portant les différents gènes viraux de type sauvage et le plasmide portant le gène S1 muté, tous sous le contrôle du promoteur T7. Après récupération de plages pures et amplification du virus, le séquençage par RT-PCR du gène S1 de 5 clones a démontré que l'épitope était présent et que les virus ne présentaient aucune autre mutation sur ce gène. Il est donc possible d’ajouter un épitope exogène à cette position sans perturber la multiplication du virus. Les travaux se poursuivent afin d’ajouter d’autres épitopes de différentes longueurs. Nous examinons aussi la possibilité qu’une autre protéine, plus abondante sur la capside, puisse aussi permettre d'augmenter davantage la spécificité d'attachement en absence de la protéine σ1.