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Résumé de la communication
Les méthodes immunohistochimiques sont utilisées pour la visualisation de protéines et de récepteurs dans les cellules ou les tissus. Récemment, il a été montré que les anticorps ciblant le récepteur opioïdergique delta (DOPR) marquent un épitope toujours présent chez les souris invalidées pour le gène de DOPR. L’objectif de nos travaux vise à développer une méthode alternative à l’utilisation des anticorps qui permettrait de visualiser DOPR. Pour cela, nous avons déterminé les propriétés pharmacologiques d’un nouveau marqueur d’affinité, associé à une biotine, qui lie de façon covalente DOPR : un analogue du TIPP (Tyr-Tic-Phe-Phe; antagoniste sélectif à DOPR). Des essais de liaison par compétition et par saturation nous ont permis, respectivement, de déterminer l’affinité de ce ligand pour DOPR ainsi que la proportion des récepteurs occupés par le TIPP. Nous avons aussi observé l’internalisation de DOPR induite par ce ligand sur des cellules DRG-F11 transfectées avec DOPR-GFP. Par ailleurs, des essais de liaison du TIPP sur des coupes de moelle épinière de rats ont aussi été réalisés. Nos résultats préliminaires indiquent que l’analogue du TIPP possède une très bonne affinité pour DOPR et qu’il n’engendre pas son internalisation. Aussi, l’analogue du TIPP permet de marquer spécifiquement DOPR dans la moelle épinière de rats. À la lumière de nos résultats, tout indique que l’analogue du TIPP pourrait nous permettre de pallier au manque d’anticorps pour le marquage de DOPR.
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