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Études spatio-temporelles de l'activation de la caspase-8

CD

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Catherine Duclos

Résumé de la communication

Les caspases sont les protéases responsables de la mort cellulaire par apoptose, survenant entre autre lorsqu’une cellule est endommagée mais aussi lors du développement normal. Deux types de caspases, initiatrices et exécutrices, participent activement à l’apoptose. Les initiatrices reçoivent le signal apoptotique, s’activent par dimérisation et transmettent le signal aux exécutrices en les clivant. L’activité de ces dernières mène au démantèlement des fonctions cellulaires et à la mort. Les mécanismes d’activation et les phénomènes découlant de l’apoptose sont de mieux en mieux caractérisés. Cependant, la localisation cellulaire des caspases demeure controversée. Afin d’étudier de manière spatio-temporelle l’activation de la caspase-8 , nous avons établi un système de transfert d’énergie de résonnance de Förster (FRET) en utilisant la paire de protéines fluorescentes CFP-YFP où l’un des chromophores est cloné en C-terminal de la caspase-8 et l’autre est cloné en N-terminal de CrmA (cytokine response modifier gene). Ce dernier est une serpine, une protéine inhibitrice de protéase, produite par le virus de la vaccine qui inhibe spécifiquement la caspase-8 active et qui a pour effet d'empêcher l'apoptose. Lors de l’induction de l’apoptose, nous pourrons observer par microscopie confocale dans les cellules vivantes le phénomène de FRET entre les dimères de caspase-8 actives couplés à l’inhibiteur spécifique CrmA. Ces expériences permettront de déterminer la localisation cellulaire où l’activation de la caspase-8 se produit.

Contexte

section icon Date : 12 mai 2011
host icon Hôte : Université de Sherbrooke, Université Bishop’s

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