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Résumé de la communication
DDX10 est une ARN hélicase de la famille «DEAD-box». Ces enzymes sont caractérisées par la présence de neuf motifs conservés formant un domaine catalytique, lequel est flanqué par des extensions qui varient en longueur et en composition d’acides aminés. Des mutations dans l’extension C-terminale de DDX10 ont été associées au cancer du sein (1). Nos expériences d’immunoprécipitation ont révélé l’association de DDX10 avec le facteur anti-apoptotique Che-1/AATF. Nous avons donc entrepris des travaux d’immuno-microscopie indirecte pour déterminer la localisation cellulaire de DDX10 et Che-1. Des cellules HeLa ont été transfectées avec une construction FLAG-DDX10 (épitope FLAG en N-terminal de DDX10). Nos résultats indiquent que DDX10 et Che-1 co-localisent dans le nucléole, suggérant que DDX10 et Che-1 participent à la biogenèse des ribosomes. Lorsque les cellules HeLa sont transfectées avec les constructions DDX10 mutées (mutations associées au cancer du sein), les mutants L566V et DDX10∆ présentent une localisation nucléolaire, mais Che-1 est exclue du nucléole. Il semble donc que les mutations de DDX10 associées au cancer du sein empêchent la localisation de Che-1 dans le nucléole. Nous développons maintenant un système qui permettra d’évaluer si ces mutations perturbent la fonction de DDX10 dans la maturation des ARN ribosomiques. (1) Sjöblom et al. Science 314: 268-274, 2006. Supporté par la Société de recherche sur le cancer et la Fondation du cancer du sein au Québec
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