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Modification des thiols des cystéines des protéines et peptides en présence de déshydroascorbate

PK

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Phyla Kay

Résumé de la communication

La déshydroascorbate (DHA) est la forme oxydée de la vitamine C (acide ascorbique) faisant partie de l’AGE (advanced glycation end products). Elle est formée lors de stress oxydatifs. La DHA est un produit instable sous des conditions physiologiques et elle est rapidement réduite en vitamine C par différentes voies enzymatiques. Il a été démontré que la DHA forme un produit de dégradation réactif pouvant se lier au thiol du glutathion. Ceci suggèrerait que ces produits de dégradation de la DHA pourraient modifier des peptides et protéines contenant des thiols libres. Les objectifs de cette étude sont de caractériser les modifications des protéines et peptides engendrées par les produits de dégradation de la DHA par spectrométrie de masse (MALDI-TOF-MS et LC-MS/MS) et la cinétique des modifications. Comme premières cibles, nous avons utilisé la chaîne β de l’insuline, l’α-lactalbumine et la BSA qu’on a incubé à pH 2,0 et 7,0. Les résultats obtenus montrent que le produit de dégradation de la DHA modifie le thiol de la cystéine des peptides en augmentant la masse de +130 Da. Suite à une préincubation de la DHA, la forme réactive réagit plus rapidement sur les thiols libres avant que celle-ci se dimérise à pH 7,0. Ces études nous permettront de clarifier le rôle de la DHA et les modifications structurelles protéiques.

Contexte

section icon Date : 12 mai 2011
host icon Hôte : Université de Sherbrooke, Université Bishop’s

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