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Communication
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Benoît Liberelle : Polytechnique Montréal
Les tests ELISA (Enzyme-Linked ImunoSorbent Assay) sont communément utilisés pour détecter et quantifier des protéines dans des solutions complexes. Dans sa version standard dite « en sandwich », des anticorps de capture capables de fixer spécifiquement l’antigène recherché sont adsorbés au fond des puits d’une microplaque. Les plaques sont ensuite bloquées par incubation d’albumine sérique bovine (BSA) avant l’incubation du ligand à détecter et des autres réactifs du test (A). La réalisation d’un test ELISA peut sembler fastidieuse et longue (environ 16 h, incluant l’adsorption de l’anticorps primaire durant une nuit).
Le présent travail propose différentes alternatives aux tests standard. La première approche consiste à greffer chimiquement une couche de polymère aux propriétés anti-adhésives pour le matériel biologique (Dextran). Cette couche a permis de réduire drastiquement le temps de préparation des tests ELISA grâce à la suppression de l’étape de blocage à la BSA et à l’attache chimique de l’anticorps de capture au fond des puits, réalisée en 15 min (B). La deuxième approche repose sur l’interaction non-covalente, réversible et stable entre deux peptides K et Ecoil. Les plaques recouvertes de Kcoils attachés chimiquement ont démontrés leurs capacités à recruter spécifiquement des ligands étiquetés Ecoil (C). La stabilité et la capacité de régénération des nouvelles constructions ainsi qu’une comparaison avec les tests ELISA standard seront présentés.
Thème du congrès 2012 (80e édition) :
Domaine de la communication :
Date :
9 mai 2012
Thème du communication :
Domaine de la communication :
