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Carolyne Simard-Bisson : Université Laval
La Dual Leucine zipper bearing Kinase (DLK), est une Mitogen-Activated Protein triple Kinase exprimée tardivement lors de la différenciation des cellules épidermiques de la peau normale humaine. Cette expression tardive nuit à son étude dans les modèles classiques de culture cellulaire (monocouche) puisqu’elle y est peu abondante. Elle est toutefois présente dans les peaux reconstruites humaines (PRH) produites dans notre laboratoire. Les travaux présentés ici visaient à développer un modèle de PRH sous-exprimant DLK afin de mieux saisir son rôle dans la différenciation des cellules épidermiques. MÉTHODE: Des PRHs ont été exposées à un vecteur lentiviral contenant une séquence d’ARN interférent dirigée contre DLK (PRH LV shRNA-DLK) au jour 0 de culture à l’interface air-liquide (A/L). Après 14 jours de culture A/L, des échantillons ont été récoltés pour des analyses histologiques et ultrastructurales. RÉSULTATS: Des marquages en immunoperoxydase ont montré une réduction de DLK dans les PRHs LV shRNA-DLK. Chez ces PRHs, des marquages en immunofluorescence ont révélé une baisse de l’expression de la filaggrine, de la transglutaminase 1 et de protéines desmosomales. En microscopie électronique, la structure des desmosomes était altérée dans les PRHs sous-exprimant DLK. CONCLUSION: Le génie tissulaire combiné à la biologie moléculaire permettent l’étude fonctionnelle de protéines dans des tissus reconstruits d’origine humaine. Support: Thécell, IRSC et FRQS
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