Colloque

Activité transcriptase inverse dans les cellules de carcinome embryonnaire humain NTera2D1

Jean-Marc Deragon

Daniel Sinnett

Damian Labuda

Membre a labase

Jean-Marc Deragon

Résumé du colloque

Les séquences répétitives L1 et Alu occupent à elles seules environ 10% du génome humain et sont amplifiées par le mécanisme de rétroposition. Ce mécanisme comprend une étape de transcription de l'ADN en ARN, une étape de transcription réverse où l'ARN est converti en ADN complémentaire (cDNA) et une étape de réinsertion dans le génome. La machinerie effectuant ces différentes étapes, se trouve, l'instant, inconnue. L'identification de la transcriptase réverse impliquée dans la rétroposition est essentielle à la compréhension des mécanismes de contrôle de ce processus. Nous avons identifié et partiellement purifié une activité transcriptase réverse dans le cytoplasme de cellules compétentes pour la rétroposition: les cellules de carcinome embryonnaire humain NTera2D1. Cette activité peut être induite de 2 à 3 fois en soumettant les cellules à une dose de 200 µg/ml d'ultraviolets. On peut détecter cette activité en utilisant la combinaison de balise anti-amorce éthylique poly(Cm)/oligo(dG) (spécifique à la transcriptase réverse) en présence d'ions Mn++. Nous avons purifié l'activité en effectuant des centrifugations sur un gradient discontinu de glycérine et un gradient continu de sucrose suivies d'une filtration sur Sephacryl S-1000. L'activité semble associée à une complexe macromoléculaire ayant les caractéristiques d'une particule pseudo-virale. Nous avons déterminé par SDS-PAGE que la composante protéique majeure de ce complexe était de 37 kD. Nous suggérons que l'activité transcriptase réverse identifiée pourrait provenir des éléments L1 reconnus pour être transcrits spécifiquement dans les cellules NTera2D1 et serait impliquée dans la rétroposition.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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