Colloque

Activité transcriptionnelle in vitro d'ADN traité à l'ozone

Catherine Mura

Young Sup Chung

Membre a labase

Catherine Mura

Résumé du colloque

L'ozone est connu pour causer des cassures simple-et double-brin dans l'ADN. Afin d'étudier l'activité matricielle de l'ADN traité à l'ozone, nous nous sommes intéressées à la réaction de transcription in vitro de l'ADN du bactériophage T7. L'ADN, extrait à partir de phages purs, a été traité à l'ozone, par barbotage, à une concentration de 5 ppm et débit de 0,05 l/min. L'activité totale ainsi que les cinétiques de transcription pour des traitements de 0, 5, 10 et 15 min mesurées par incorporation radioactive de 3H-UTP, montrent une diminution de la synthèse d'ARN en fonction du traitement d'ozone appliqué. L'ozone dans ces conditions entraîne un traitement de 10 min, estimé par électrophorèse, est inférieur au témoin. Enfin, l'hybridation entre ARN synthétisés in vitro et chacun des brins d'ADN séparés, après dénaturation, par ultracentrifugation en présence de pol, montre que la synthèse est de plus en plus asymétrique avec un traitement à l'ozone croissant, alors que sans traitement elle est totalement asymétrique. Il y a donc création de nouveaux sites d'initiation pour l'ARN polymérase. Ces résultats indiquent que les dommages causés à l'ADN par l'ozone altèrent les propriétés matricielle de l'ADN.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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