Colloque

Adaptation d'un système de culture de cellules à quatre cultivars de luzerne

Yves Cloutier

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Yves Cloutier

Résumé du colloque

Brown et Atanassov (1984) ont décrit des milieux modifiés à partir de B5, pour cultiver des cellules de luzerne en suspension. Toutefois le pourcentage de viabilité cellulaire n'était pas critique pour leurs travaux. Dans la présente étude j'ai besoin d'augmenter la viabilité cellulaire au maximum afin d'augmenter l'efficacité des études biochimiques. De plus j'aimerais comparer la viabilité mesurée avec deux différents colorants : le FDA et le TTC. Les cellules furent obtenues à partir de cales suivantes : semis stérile et bouturage stérile de plantules. Suspension liquide de 2 g de cales âgées de six semaines. Lancer des cellules en suspension liquide à toutes les deux semaines avec un milieu B5 frais. La viabilité était mesurée d'après la fluorescence du FDA et la réduction du TTC après 1 h. La viabilité était faible (20-40) % dans les cellules d'ambre, Sarance, Oneida VR et 101. Mais les résultats obtenus avec le TTC étaient plus élevés que ceux obtenus avec le FDA. Il est donc nécessaire de modifier les milieux de culture afin d'augmenter la viabilité cellulaire. J'ai refait les milieux en ajoutant du saccharose et de la gélatine. Les résultats obtenus avec le TTC et le FDA ont montré que les milieux avec 5% de saccharose et 0,1% de gélatine ont permis d'atteindre un résultat satisfaisant. Je me suis servi des deux méthodes de coloration pour établir une méthode de culture permettant une bonne croissance de tous les cultivars.

Contexte

Section :

Botanique et écologie végétale

Thème du colloque :

Botanique et écologie végétale

Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

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