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Ajustement de l'osmolalité du Percoll

Renaud Vincent
Denis Nadeau
RV

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Renaud Vincent

Résumé du colloque

L'osmolalité d'un gradient densité est une variable qui affecte la densité de flottaison des cellules et des organites cellulaires. L'addition d'une partie d'un concentré (10 x) de saline ou de sucrose à 9 parties de Percoll produit un milieu de centrifugation hypertonique (~350 mosm). En utilisant un concentré en partie de silice, une fraction de son volume est incluse dans le fluide des solutions. Nous avons observé qu'un milieu dont l'osmolalité est équivalente à celle de la saline ou du sucrose est obtenu en utilisant l'équation suivante: Vp = Vc [Oe - Of] [Of - Op] (où Vp: volume de Percoll à ajouter; Vc: volume de concentré utilisé; Oe: osmolalité de Percoll; Oc: osmolalité du concentré; Of: osmolalité finale désirée; R: rapport du volume aqueux accessible par les solutés, sur le volume total du Percoll). Le rayon hydraté des particules de PVP-silice variant avec la force ionique du milieu, la valeur de R utilisée varie aussi avec le lieu que l'osmolalité du Percoll est ajustée en un concentré de saline ou de sucrose. R peut être estimée calculée à partir des mesures d'osmolalité, et vérifiée pour chaque nouveau lot de Percoll. Les équations mathématiques dérivées de ces observations permettent de contrôler avec précision l'osmolalité des gradients de densité de Percoll.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire et moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université Laval

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Titre du colloque :

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