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Amplification d'ADN chez un mutant de Leishmania résistant à l'antimoine pentavalent

Anas Haimeur
Marc Ouellette
AH

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Anas Haimeur

Résumé du colloque

Leishmania est un parasite protozoaire infectant plusieurs millions de personnes et responsable de plusieurs pathologies différentes. La drogue de choix contre toutes les formes de Leishmania est constituée de dérivés de l'antimoine pentavalent. L'antimoine est un oxyanion et plusieurs mutants ont été sélectionnés pour une résistance élevée à différentes oxyanions notamment l'antimoine trivalent, l'antimoine pentavalent ainsi que l'arsenite. Plusieurs types de mutations ont été observés chez différents mutants et plusieurs locus ont été amplifiés sous forme d'éléments extra chromosomiques soit circulaires ou linéaires. Chez un mutant résistant à l'antimoine pentavalent nous avons observé un nouvel amplicon. La caractérisation de cet amplicon a révélé qu'il était dérivé d'un chromosome de 1800 Kb. Avec plusieurs enzymes de restriction nous avons obtenu un amplicon de 7 Kb déjà généré ou suggérant une répétition en tandem. Par contre la taille de cet amplicon est variable et nous n'avons pu trouver le même type d'arrangement en l'ADN chez une cellule sauvage suggérant qu'un arrangement chromosomique est préférentiellement amplifié. Pour vérifier le rôle de cet arrangement dans la résistance nous l'avons inséré dans un vecteur d'expression que nous avons introduit dans des cellules sauvages. Les transfectants étaient plus résistants que les contrôles. Tous les oxyanions testés les mais pas les métaux lourds n'ont apparentes comme sensibles. Des études de sous-clonages et de séquence sont en cours pour identifier le mécanisme de résistance à des drogues utilisé par les cellules résistantes à l'antimoine.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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