Colloque

Amplification et expression des gènes métallothionéines dans les cellules de souris

Jacques Thibodeau

Aristide C. De Souza

Jean Paul Thiery

Membre a labase

Jacques Thibodeau

Résumé du colloque

L'amplification de segments d'ADN est un mécanisme cellulaire de régulation de l'expression génique. Afin d'étudier ce phénomène, nous avons sélectionné in vitro des cellules L de souris résistant au chlorure de cadmium (CdCl2). Les gènes impliqués dans la résistance au cadmium sont induits par les métaux lourds et codent pour de petites protéines (6 à 7 kDa) appelées métallothionéines I et II (MT-I, -II) qui fixent ces métaux. Nous discutons ici 1) l'isolement de mutants résistants au cadmium (Cd2+), 2) l'instabilité d'amplification en absence de sélection, 3) l'amplification coordonnée des gènes MT-I et MT-II sous 1 à 3 copies/gène/cellule tel que démontré par 'Southern blots', 4) l'organisation et la localisation des gènes amplifiés, 5) l'expression différentielle des gènes amplifiés en réponse à différents inducteurs et enfin, 6) la nature des protéines avec la cystéine-32 et leur séparation sur gels de polyacrylamide en dénaturant. Nous démontrons que les gènes MT-I seul peuvent perdre la capacité d'amplification sous l'inococorticoïdes après l'amplification. Ces résultats démontrent que les gènes MT-I et MT-II sont co-amplifiés et que ces études permettent de mieux comprendre et étudier les régions régulatrices responsables de l'expression génique.

Contexte

Section :

Biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biologie moléculaire

Hôte : Université de Montréal

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