Colloque

Amplification par PCR du gène de la pyruvate kinase dans des organismes phylogénétiquement éloignés

Marie-Louise D'Auteuil

Eveline De Medicis

Pierre Bélisle

Membre a labase

Marie-Louise D'Auteuil

Résumé du colloque

La pyruvate kinase, un enzyme de la glycolyse, est trouvé chez la plupart des organismes vivants. Certaines séquences peptidiques de la pyruvate kinase sont conservées à travers l'évolution depuis les micro-organismes jusqu'à l'homme. En utilisant comme amorces deux nucléotides de synthèse "dégénérés," l'un complémentaire au brin codant, et l'autre complémentaire au brin non-codant de deux régions homologues proches dans le gène, nous avons pu amplifier l'ADN génomique correspondant à la pyruvate kinase dans chaque autre espèce vivante. Cette stratégie a permis de cloner une partie du gène de la pyruvate kinase L humaine (680pb) et de la pyruvate kinase de Halobacterium cutirubrum (110 pb) à partir des mêmes amorces polynucléotidiques. C'est donc une méthode simple de générer à partir de séquences non spécifiques des sondes qui sont spécifiques parce qu'elles proviennent des séquences conservées dans l'évolution des espèces.

Contexte

Section :

Biochimie

Thème du colloque :

Biochimie

Hôte : Université du Québec à Montréal

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