pen icon Colloque
quote

Amplification sélective de l'ADN complémentaire du locus hprt à partir d'un lysat de lymphocytes humains

Dany Hallé
Stéphane Vincent
Hélène Dubeau
Éric Rassart
DH

Membre a labase

Dany Hallé

Résumé du colloque

Jusqu'à tout récemment, il était impossible de déterminer le spectre complet des changements induits au locus hprt chez des lymphocytes mutants humains HPRT- parce que : 1) la méthode de Southern ne permettait pas de mettre en évidence les délétions de taille inférieure à 6 kb; 2) les mutants ne pouvaient être perdus car leur culture ne permettait pas d'obtenir les 10 millions de cellules nécessaires pour l'extraction de l'ADN et 3) l'amplification sélective (PCR) de l'ADN complémentaire à l'ARNc du gène hprt à partir de lysat cellulaire n'était pas possible à cause de ces problèmes. De plus, Yang et al (1989) ont démontré que le régime développé selon laquelle l'ARN hprt est amplifié à partir du lysat cellulaire d'un faible nombre de fibroblastes humains ce qui permet de résoudre le second problème. Cependant, lorsque nous avons tenté d'adapter cette approche aux lymphocytes humains, nous avons constaté que des éléments présents dans le lysat cellulaire inhibent la réaction de PCR et ce, même lorsque l'ADNc hprt était déjà ajouté comme matrice. Diverses stratégies ont été utilisées pour déterminer la source de ce problème et l'éliminer.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Montréal

Découvrez d'autres communications scientifiques

news icon

Titre du colloque :

Biologie moléculaire
Clonage d'un gène d'autolysine de Streptococcus faecalis ayant une activité anti-Clavibacter michig…
Catherine Beliveau
La saccharose synthase et la régulation de son expression dans la feuille en croissance
Binh Nguyen Quoc
Caractérisation d'un ADNc de Brassica napus homologue à un facteur trans-actif de tabac
Isabelle Charlebois
Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

news icon

Thème du colloque :

Biologie moléculaire
Amplification sélective de l'ADN complémentaire du locus hprt à partir d'un lysat de lymphocytes hu…
Dany Hallé
Amplification sélective de l'ADN complémentaire du locus hprt à partir d'un lysat de lymphocytes hu…
Dany Hallé
Amplification sélective de l'ADN complémentaire du locus hprt à partir d'un lysat de lymphocytes hu…
Dany Hallé