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Analyse de gènes qui sont différentiellement exprimés en réponse au composé anticancéreux 4-ter-butyl-[3-(2-chloroéthyle)uréido]benzène (tBCEU)

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Patrick Poyet

Résumé du colloque

Nous avons déjà montré que la tBCEU était un composé dont les propriétés antimitotiques étaient reliées à une dépolymérisation des microtubules. Toutefois, nous ne savons pas cette action sur les microtubules est direct ou indirecte. De plus, nous avons observé que la tBCEU pouvait moduler la synthèse de plusieurs protéines différentes des microtubules. Afin de poursuivre cette étude, nous avons tenté d'identifier, à l'aide d'une méthode de criblage des ARNm par amplification à la TAQ polymérase (RT-PCR), tous les ARNm dont les niveaux seraient modulés par l'action de la tBCEU. Ainsi, les ARN provenant d'une lignée de cellules dérivant d'un cancer du sein (lignée MDA-MB-231) préalablement cultivées durant 6 heures en présence ou en absence de 30µM de tBCEU ont été purifiés. Ces populations d'ARN nous avons permis d'isoler plusieurs séquences d'ARNm dont les niveaux étaient soit augmentés ou soit diminués en présence de tBCEU. Par exemple, nous avons isolé une séquence (clone 7.1) dont le niveau est augmenté en présence de tBCEU. Ce clone possède 96,9% d'homologie avec un transcrit du génome mitochondrien. Ces résultats ont été confirmés par analyse Northern. Nous avons aussi observé une augmentation maximale des niveaux de cet ARN après une période de 24 heures de culture en présence de tBCEU. De plus, nous avons observé que l'augmentation des niveaux de ce transcrit était spécifique à la tBCEU car aucun effet de la daunorubicine, la vinblastine le chlorambucil, le taxol et le BCNU a été observé. Donc, nos données indiquent qu'il est possible d'utiliser la technique du RT-PCR pour éventuellement déterminer le(s) mécanisme(s) d'action d'un composé anticancéreux.

Contexte

host icon Hôte : Université de Trois-Rivières

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