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Analyse de l'expression de la chaîne β du récepteur de cellule T (Tcr) par la focalisation isoelectrique

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Christine Gagnon

Résumé du colloque

Plusieurs auteurs ont démontré que le répertoire de l'expression de la région variable (V) des Tcr varie de la sous-population de cellules CD4+ à la sous-population CD8+. Cependant, les méthodes utilisées ne permettent pas l'analyse d'un grand nombre d'individus. Nous avons développé une méthode qui permet une analyse rapide et très détaillée du profil d'expression des chaînes Vβ dans les cellules CD4+ et CD8+ du sang périphérique, extraire l'ARN total, faire du RT-PCR, et analyser les produits de PCR par focalisation isoelectrique (IEF). Les bandes volumineuses sur gel d'IEF sont ensuite transférées sur membranes et hybridées avec des sondes spécifiques pour les chaînes Vβ 3, 6, 12, 14 et 18 dans les cellules CD4+ et CD8+. Nous avons détectées des différences d'expression des chaînes Vβ 3 et 6. En fait, il n'y avait expression de bandes Vβ-3 dans les cellules CD4+ qui n'était pas détectée dans les cellules CD8+. Aussi, il y avait surexpression de quelques bandes Vβ-6 dans les cellules CD8+ par rapport aux cellules CD4+. En accord avec la littérature, ces résultats suggèrent que quelques gènes de Tcr sont exprimés préférentiellement dans une sous-population de cellules par rapport à d'autres. Ces expériences ont été faites sur seulement quelques individus, il serait donc intéressant d'analyser un grand nombre d'individus ainsi que des individus ayant des maladies auto-immunes pour voir si le patron d'expression est conservé chez eux ou s'il y a corrélation entre une maladie et l'expression du répertoire de chaînes Vβ.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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Titre du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire

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Thème du colloque :

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