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Analyse de l'organisation moléculaire et de l'évolution de transposons complexes par génie génétique

RC

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Roger C. Levesque

Résumé du colloque

À l'aide des techniques du génie génétique, nous avons débuté une analyse moléculaire détaillée de dix transposons B-lactamases complexes. Les cartes physiques d'ADN de ces éléments génétiques mobiles ont été construites à l'aide des endonucléases de restriction BamHI, BglII, EcoRI, HindIII, et SstI et comparées à des transposons connus tels que Tn3, Tn4, Tn21 et Tn263. Les gènes B-lactamases ont été isolés par le clonage moléculaire dans le plasmide pACYC184 et localisés sur les cartes physiques des transposons étudiés. L'homologie structurale des gènes transposases-résolvases a été évaluée par hybridation avec des acides nucléiques en utilisant des fragments d'ADN spécifiques aux gènes tnpA-tnpR de transposons connus. Les fragments homologues ont été localisés par la méthode de Southern. Dans certains cas, l'homologie fonctionnelle a été démontrée par la complémentation génétique en trans en utilisant un mutant de Tn21 déficient dans le gène tnpR. Les résultats préliminaires démontrent que les transposons B-lactamases complexes étudiés apparaissent entourés d'au moins deux familles distinctes. Certaines particularités de ces transposons telles que l'amplification des gènes B-lactamases, la production de didésoxygénase et les arrangements génétiques seront également discutées.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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