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Analyse des hépatocytes de rat par cytométrie en flux

F. Guérin
M. Lachapelle
M. Fournier
S. Fadlallah
S. Mansour
D. Filipe
FG

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F. Guérin

Résumé du colloque

L'objectif principal de cette étude est de développer une méthodologie basée sur la cytométrie en flux pouvant servir en toxicologie hépatique. La viabilité cellulaire a été déterminée au moyen de deux colorants fluorométriques: l'iodure de propidium et le diacétate de carboxyfluorescéine. Ce dernier ne semble pas être un colorant approprié pour l'évaluation de la viabilité cellulaire contrairement à l'iodure de propidium. L'organisation lipidique des membranes plasmiques a été évaluée avec la merocyanine 540. Les cellules viables demeurent négatives en présence de ce colorant alors que les cellules mortes se colorent. Les composés mis en évidence par coloration des membranes cytoplasmiques sont d'une famille 5-fluorescents. L'activité des enzymes du cytochrome P450 a été évaluée par la mesure de la fluorescence produite du méthoxyresorufine, ethoxyresorufine et le benzyloxyresorufine. Les N-nitrosodiméthylamine et le murinex ont été utilisés comme substrats spécifiques. Les résultats obtenus par cytométrie en flux démontrent que l'analyse de la viabilité hépatique représente une nouvelle approche rapide, précise, et viable dans des plus nombreuses substances.

Contexte

Section :
Pharmacologie et toxicologie
news icon Thème du colloque :
Pharmacologie et toxicologie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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