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Analyse des mutations "fortes" spontanées dans le gène TX du virus HSV-1 situé sur un chromosome d'une lignée cellulaire humaine

Josée J. Brisebois
Margaret Durko
Marina V. Pascal
Michael S. Dubow
JJ

Membre a labase

Josée J. Brisebois

Résumé du colloque

Afin d'obtenir des informations importantes sur la nature des altérations structurales d'un chromosome pouvant 'l'inactiver' et résulter en des instabilités génétiques fortement récessives et spontanées, nous avons développé un système permettant de sélectionner des mutations dites fortes, ou nulles, et spontanées dans le gène de la thymidine kinase (TK) du virus herpes simplex type 1 (HSV-1) inséré dans le plasmide pSV2ne0TK et localisé sur une copie dans un chromosome d'une lignée cellulaire humaine transformée: AK143 TK-. A l'aide d'analogues de base anti-TK (TFT, ACV, DHPG) utilisées en combinaison et de l'antibiotique G418 (néomycine), des mutations fortes à taux de réversion très faible ou nul ont été sélectionnées. Les analyses de Southern révèlent que ces mutations sont souvent des délétions du gène TK mais d'autres altérations structurales ont aussi été observées. Le niveau d'activité de l'enzyme TK des clones, le taux de transcription en ARNm du gène TK et le taux de réversion de ces mutations ont aussi été calculés. Notre modèle permet l'analyse des mécanismes moléculaires des mutations "fortes" spontanées d'un gène dans un contexte chromosomique humain et de déterminer des causes probables de maladies génétiques spontanées.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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