Communication

Analyse d'expression et localisation des protéines tr-kit et c-kit chez le spermatozoïde de souris

Pascal Amireault

François Dubé

Membre a labase

Pascal Amireault

Résumé de la communication

L'activation de l'ovocyte par le spermatozoïde fécondant est provoquée, initialement, par une série d'oscillations dans la concentration intracellulaire de calcium. Le mécanisme par lequel le spermatozoïde entraîne ces réponses calciques chez l'ovocyte demeure, à ce jour, inconnu. Les deux principales hypothèses évoquent soit un facteur protéique spermatique soluble transmis à l'ovocyte lors de la fusion, soit une interaction de type ligand-récepteur au niveau de la membrane plasmique de l'ovocyte. Parmi les protéines spermatiques candidates comme facteur activateur soluble potentiel, certains travaux suggèrent que la protéine tr-kit pourrait jouer ce rôle. Cette protéine spermatique tr-kit est, en fait, un variant tronqué du récepteur tyrosine kinase c-kit, ne possédant qu'une portion de l'extrémité C-terminale du récepteur complet. Le récepteur c-kit lui-même est reconnu jouer un rôle important au cours de la spermatogénèse dans la différenciation des spermatogonies, mais il est généralement admis qu'il n'est plus présent au stade de spermatides ou dans les spermatozoïdes mûrs. Certains autres travaux soutiennent toutefois que le récepteur c-kit est présent dans les spermatozoïdes mûrs où il jouerait un rôle dans la réaction de l'acrosome. Afin d'élucider ces discordances dans les observations rapportées par diverses équipes, nous avons examiné l'immunoréactivité des spermatozoïdes mûrs de souris à deux anticorps dont l'un est spécifique à la protéine c-kit, tandis que l'autre reconnaît à la fois c-kit et tr-kit. Nos résultats de marquage par immunofluorescence indirecte révèlent plusieurs faits nouveaux. Tout d'abord, contrairement aux études précédentes, nous avons localisé la protéine tr-kit principalement dans la région acrosomiale mais aussi dans une région interne à la base du flagelle, la pièce connectrice. Le marquage principal associé à l'acrosome est perdu chez les spermatozoïdes ayant subi la réaction de l'acrosome, ce qui est incompatible avec la transmission présumée de cette portion de tr-kit dans l'ovocyte. D'autre part, contrairement à d'autres travaux récents, nous n'avons détecté aucune présence de la protéine c-kit dans les spermatozoïdes mûrs. Des analyses de type Western, en cours, de même que des études d'immunoréactivité et d'hybridation in situ sur des coupes de testicules, visant la détection en parallèle des messagers et des protéines tr-kit et c-kit, permettront d'élucider les rôles respectifs potentiels de ces deux protéines.

Contexte

Section :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Domaine de la communication :

Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Montréal

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