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Résumé du colloque
Nous avons récemment mis en évidence l'existence d'un ADNc de P450e contenant 24 pb supplémentaires par rapport à la séquence conventionnelle de l'ADNc du P450e. Ces 24 pb se retrouvent à la frontière des 5e et 6e exons et correspondent aux 24 premières pb du 5e intron. Leur traduction ajouterait 8 acides aminés supplémentaires à la protéine P450e. Dans une même banque, deux clones (PB22) et (PB16) contiennent l'ajout de 24 pb et un autre (PB13) ne le contient pas. Nous avons émis une hypothèse d'épissage alternatif pour expliquer la présence de 2 formes d'ARNm de P450e. Pour poursuivre l'étude des deux formes protéiques possibles de P450e, nous avons effectué une construction de l'ADNc de P450e pleine longueur avec (variant) et sans (non-variant) l'ajout de 24 pb. Les ADNc variant et non-variant de P450e ont pu être insérés et clonés chez les vecteurs d'expression eucaryotes pMEX et p91023(B) pour expression dans les cellules COS. Ceci permettra de préciser l'importance biologique de ce qui pourrait être un cas d'épissage alternatif d'un ARN de P450 ne conduisant pas à un ARNm aberrant.
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