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Analyse immunoenzymatique de la souche JHM du coronavirus murin

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Pierre Talbot

Résumé du colloque

Les coronavirus sont très répandus dans la nature et causent chez les souris diverses maladies telles hépatites, entérites et encéphalomyélites. La souche neurotrope JHM nous fournit un modèle animal de troubles neurologiques démyélinisants tels la sclérose en plaques. Nos travaux de caractérisation de ce virus ont nécessité le développement d'un test immunoenzymatique de type ELISA. Nous décrivons une approche nouvelle dans la préparation de l'antigène viral qui consiste à utiliser un extrait membranaire de cellules infectées. Une optimisation des conditions expérimentales de liaison de l'antigène au plastique des microplaques (concentration protéique, temps, température et pH) nous a permis de développer un test très sensible et économique. En plus d'utiliser ce test pour la détection d'anticorps dirigés contre le virus, nous avons développé une technique de compétition en utilisant un anticorps monoclonal conjugué à la peroxydase et un autre anticorps, soit monoclonal ou polyclonal, ce qui nous a permis de caractériser la structure antigénique des protéines virales, de même que d'analyser la production chez l'animal d'anticorps dirigés contre des sites antigéniques précis.

Contexte

host icon Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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