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Analyse par cytométrie en flux des effets du tri-n-butylétain (TBT) sur le calcium cytosolique libre, le pH intracellulaire et les thiols chez les hépatocytes de truite

Stéphanie Reader
Harald B. Steen
Francine Denizeau
SR

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Stéphanie Reader

Résumé du colloque

Le TBT est un contaminant environnemental reconnu. Du au manque de connaissance sur le mode d'action du TBT au niveau cellulaire, le but de ce présent travail était d'étudier les effets toxiques du TBT sur les hépatocytes de truite (Oncorhynchus mykiss) isolés. Nous avons développé une procédure permettant l'étude du calcium cytosolique libre (Cai) dans ces cellules par cytométrie en flux (CMF) à l'aide de l'indicateur fluorescent, le Fura Red. La sonde Indo-1 a été utilisée pour valider cette procédure. Parallèlement, le pH intracellulaire (pHi) et les niveaux de thiols ont été suivis par CMF à l'aide des sondes SNARF-1 et CMFDA, respectivement. La viabilité cellulaire a aussi été évaluée par CMF à l'aide de l'iodure de propidium. Le traitement des hépatocytes avec le TBT induit une augmentation des niveaux de Cai et une baisse du pHi. Les résultats obtenus avec le TBT indiquent une hausse des niveaux de thiols dans les cellules ayant perdu la viabilité et sont détectables. Les changements dans le Cai ne sont pas dépendants de la concentration en calcium dans le milieu (0.65 et 1.50 mM TBT) contrairement aux concentrations plus élevées (0.5 et 1 µM). De plus, le TBT induit une rapide diminution du pHi accompagnée d'une augmentation de la concentration en thiols. Ces résultats indiquent des phénomènes de régulation des niveaux de thiols et de Cai, et une indication des indices de toxicité du TBT chez les hépatocytes de truite.

Contexte

Section :
Plan d'Action Saint-Laurent : résultats de la recherche
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Plan d'Action Saint-Laurent : résultats de la recherche
host icon Hôte : Université du Québec à Rimouski

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Titre du colloque :

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