Augmentation de l'expression de la phospholipase cytosolique A2 (cPLA2) par l'hormone chorionique gonadotropine humaine (hCG) dans les follicules préovulatoires bovins
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Résumé du colloque
La relâche préovulatoire de l'hormone lutéinisante (LH) stimule la synthèse des prostaglandines (PG) en induisant l'expression de la PGH synthétase type 2 (PGHS2 ou COX2) et de la PGE2 synthétase (PGES). L'acide arachidonique issu des phospholipides membranaires constitue le substrat de PGHS2. Basé sur l'hypothèse voulant que l'expression de cPLA2 soit responsable de la libération de l'acide arachidonique durant la période périovulatoire, l'objectif était de caractériser l'ADNc de cPLA2 bovin et d'étudier son patron d'expression spatio-temporel dans les follicules préovulatoires. Un fragment d'ADNc cPLA2 bovin, isolé à partir d'une génothèque soustraite de follicules ovulatoires, a servi de sonde afin de cloner l'ADNc cPLA2 complet. La régulation de l'ARNm (RT-PCR) et de la protéine (western, immunohistochimie) cPLA2 a été étudiée dans les follicules bovins obtenus à différents stades de développement : 4 mm, dominant au jour 5 (J5) et J7 du cycle oestral, en période ovulatoire suivant l'injection d'hCG (0, 6, 12, 18, 23 hr) et dans les corps jaunes (CJ) isolés à J5. Les résultats démontrent que l'ADNc (2.8 kb) cPLA2 contient un ORF (2247 pb) codant pour une protéine de 85.3 kDa, une région 5'UTR (140 pb) et 3'UTR (476 pb). Un transcrit cPLA2 de 3.1 kb a été détecté dans tous les stades folliculaires et une augmentation significative observée dans les follicules ovulatoires à partir de 12 hr post-hCG (maximum à 18 hr). Contrairement à cPLA2, l'ARNm de la forme sécrétée de PLA2 (sPLA2) a démontré une expression maximale dans les follicules 4 mm et aucune variation significative ne fut observée suivant l'injection d'hCG. La protéine cPLA2 a été localisée principalement dans la granulosa et un faible signal fut détecté dans la thèque interne des follicules dominant et ovulatoire. En conclusion, les résultats de cette étude suggèrent que l'augmentation d'expression de cPLA2 par la LH est impliquée dans la synthèse des PG essentielle au processus ovulatoire.
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