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Biosynthèse de l'inosine dans les tRNA de levure

M. Dugre
R.J. Cedergen
MD

Membre a labase

M. Dugre

Résumé du colloque

L'inosine est présent à l'extrémité 5' de l'anticodon (position wobble) de plusieurs tRNA provenant d'organismes procaryotes et eucaryotes. Puisque ce nucléoside modifié joue un rôle extrêmement important dans la reconnaissance du RNA messager, nous avons entrepris une étude de sa biosynthèse. Le mutant ade 13 de Saccharomyces cerevisiae a été utilisé. Ce mutant déficient en adénylosuccinate lyase permet d'obtenir des tRNA marqués soit principalement au niveau des adénosines et leurs modifications ou soit au niveau des adénosines et guanosines ainsi que leurs modifications. Nous avons tout d'abord étudié les besoins en adénine du mutant ade 13. Nous avons aussi mis au point une méthode de séparation des mononucléotides sur colonne de DEAE-cellulose suivie d'une chromatographie en deux dimensions sur couche de cellulose. Nous avons choisi d'hydrolyser les tRNA enzymatiquement et avons mesuré le pourcentage de désamination de l'AMP conduisant à la formation d'IMP au cours de cette hydrolyse. Les résultats que nous avons obtenus en combinant ces techniques démontrent que l'IMP n'est pas incorporé tel quel dans les tRNA à partir de l'ITP mais provient de la modification post-transcriptionnelle d'une adénosine.

Contexte

Section :
Biochimie
news icon Thème du colloque :
Biochimie
host icon Hôte : École polytechnique de Montréal

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Titre du colloque :

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