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Caractérisation de la poly (ADP-ribose) polymérase chez les macrophages alvéolaires de rat

M. Lauzier
Y. Brousseau
G.G. Poirier
D. Nadeau
ML

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M. Lauzier

Résumé du colloque

Les cellules alvéolaires libres des poumons de rats sont isolées par lavage bronchoalvéolaire à l'aide d'une solution balancée de Hank's modifiée (sans Mg²⁺ et Ca²⁺). La population de cellules ainsi obtenue est constituée à 90-95% de macrophages viables (exclusion du Trypan bleu). Les macrophages (MQ) sont perméabilisés à l'aide d'un tampon contenant Triton-X100 à 0.05%. Les conditions optimales de l'activité poly (ADP-ribose) polymérase furent établies en incubant les MQ perméabilisés en présence de substrat (NAD³²P). La réaction enzymatique est arrêtée par précipitation au TCA (15%). A 30°C, l'enzyme possède un pH optimum de 8 et est activée par les ions Mg²⁺ (3 mM). Le Km de l'enzyme se trouve entre 225 et 250 µM. Nous avons trouvé que l'enzyme était activable par la DNase et que l'accepteur principal du polymère semblait être l'histone H1.

Contexte

Section :
Pharmacologie et toxicologie
news icon Thème du colloque :
Pharmacologie et toxicologie
host icon Hôte : Université de Sherbrooke

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Titre du colloque :

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