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Caractérisation de la stimulation GTPγS-dépendante de l'activité de méthylation de classe II du cortex rénal

Diane Bilodeau
Richard Beliveau
DB

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Diane Bilodeau

Résumé du colloque

La carboxyle méthyltransférase de classe II (CMT II) participe au recyclage de protéines endommagées. Elle reconnait spécifiquement des résidus aspartyles inhabituels résultant d'isoimérisation, de déamidation et de racémisation survenant spontanément au cours du vieillissement cellulaire. L'enzyme catalyse le transfert de groupements méthyles vers la fonction carboxyle portée par la chaîne latérale de ces résidus altérés. Cette méthylation est la première étape de leur reconversion vers une forme normale. La CMT II du cortex rénal présente une caractéristique unique: son activité endogène est fortement stimulée en présence de GTPγS, suggérant ainsi l'implication d'une protéine G. Cette stimulation est elle-même inhibée par l'ajout de phosphatase, indiquant l'intervention possible d'une phosphatase. Pour mieux caractériser cette activité de stimulation, nous avons fractionné les protéines cytosoliques sur Mono Q et Superose 6. Dans le premier cas, on observe deux pics de stimulation: le plus important lié avec l'ensemble des protéines non retenues par la colonne, alors que le deuxième pic apparaît après l'application d'environ 0.15M NaCl. Le tamis moléculaire révèle également deux pics: le premier pic correspond à une protéine d'environ 40 kDa et le pic secondaire est causé par une protéine d'environ 22kDa. La fraction de la protéine G impliquée (irréductible ou petite G?) a été étudiée à l'aide d'anticorps spécifiques, d'un test de fixation de GTPγS, de fluorure d'aluminium, le mastoparan et les toxines botuliques et pertussique. L'implication possible d'une phosphatase a été étudiée à l'aide de "acid phosphatase", vanadate et acide okadaïque. Ces résultats démontrent l'importance de l'activité de la CMT II du rein laisse présager l'importance des réactions de méthylation pour le bon fonctionnement de cet organe.

Contexte

Section :
Biologie cellulaire
news icon Thème du colloque :
Biologie cellulaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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