Colloque

Caractérisation de MEP-1 et MTF-1, deux protéines liant l'élément de régulation MREd du promoteur de la MT-1 des souris

Olivier Larochelle

Gale Stewart

Carl Séguin

Membre a labase

Olivier Larochelle

Résumé du colloque

Les métallothionéines (MT) sont des protéines de stress qui participent au métabolisme des métaux essentiels (Zinc, Cuivre) et qui protègent l’organisme contre l’intoxication en fixant les ions de métaux lourds. Les gènes des MT sont inductibles au niveau transcriptionnel par les métaux et cette stimulation est assurée au niveau de l’ADN par des séquences appelées MRE, sur lesquelles se fixent des protéines de régulation activées par les métaux. Ces protéines agiraient comme détecteurs intracellulaires de métaux et comme activateurs de la transcription. Dans le but de caractériser deux de ces protéines nucléaires, MEP-1 et MTF-1, nous avons procédé à des essais de retardement sur gel (EMSA) en utilisant la sonde MREs, des fractions purifiées MEP-1 provenant d’une colonne d’affinité MRE et des extraits de cellule COS surexprimant MTF-1. Le complexe formé par MTF-1 et la sonde MREs migre plus lentement que celui formé par MEP-1, suggérant que les poids moléculaires (PM) des deux protéines sont différents. Une étude de dénaturation (SDS-PAGE) sur des fractions purifiées MEP-1 suivi d’une renaturation et d’un EMSA a permis d’évaluer le PM apparent de MEP-1 à 60 kDa comparativement à 72.5 kDa pour MTF-1. En plus de montrer par EMSA que ces deux protéines lient de façon spécifique les séquences MRE du promoteur MT-1 de souris, nous avons étudié l’effet des composants (Métaux, NaCl, KCl, DTT, MgCl2, pH et température) sur la liaison à l’ADN de ces protéines. Ces résultats suggèrent que MEP-1 et MTF-1 possèdent des propriétés de liaison à l’ADN distinctes mais que leur liaison à l’ADN est dépendante des ions Zinc.

Contexte

Section :

Biologie et génétique moléculaires

Thème du colloque :

Biologie et génétique moléculaires

Responsables :

Louis Bernatchez

Hôte : Université Laval

Découvrez d'autres communications scientifiques

Dans le même colloque
Du même congressiste

Titre du colloque :

Biologie et génétique moléculaires

Étude d'un déphasage programmé du cadre de lecture des RNA messagers dans un système procaryote

Marie-Noëlle Brunelle

Diversité génétique et conservation de l'if du Canada (Taxus canadensis Marsh) au Québec

Sauphie Senneville

Réaction croisée de l'anticorps monoclonal IgG-C7 avec les récepteurs humains et de rat pour les li…

Hong Zheng

Voir tous les contenus de ce colloque

Autres communications du même congressiste :

Thème du colloque :

Biologie et génétique moléculaires

Régulation de l'expression du gène encodant le facteur d'inhibition de croissance neural (GIF/MT-11…

Jean-Charles Dussault

Caractérisation de MEP-1 et MTF-1, deux protéines liant l'élément de régulation MREd du promoteur d…

Olivier Larochelle

Caractérisation de MEP-1 et MTF-1, deux protéines liant l'élément de régulation MREd du promoteur d…

Olivier Larochelle