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Résumé du colloque
Le sujet de la communication portera sur l’élucidation des mécanismes d’activation de la réplication stable et constitutive (cSDR) chez E. coli. Ce type de réplication chez E. coli peut survenir lorsque le gène responsable de la synthèse de la RNase H (rnhA), qui dégrade l’ARN présent dans les hybrides ARN-ADN, est inactivé. Il est présumé qu’en absence de la RNase H, certains hybrides ARN-ADN persistent formant ainsi une structure R-loop qui peut servir de site d’initiation pour la réplication. Ce type de réplication de l’ADN peut se dérouler en absence de synthèse protéique, peut s’initier à des origines de réplication autres que l’origine normalement utilisée (oriC). Ces origines de réplication alternatives n’ont toutefois jamais été identifiées. Il est important de mentionner que les origines de réplication cSDR dans des mutants rnhA- sont activées par des shift-up nutritionnels et que leur fonctionnement est relA-dépendant. Ces deux points, avec le fait que les opérons rrn sont non-traduits, suggèrent fortement que les origines de réplication alternatives sont localisées dans les opérons rrn. Des sites de formation des R-loops dans l’opéron rrnB ont été récemment identifiés dans notre laboratoire. En utilisant ces séquences sous contrôle d’un promoteur inductible à l’IPTG et sur un plasmide avec une origine de réplication thermosensible, il est possible de démontrer qu’elles peuvent servir d’origine de réplication.
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