Colloque

Caractérisation de protéines associées dans le cotransport Na+/Pi rénal

Christian Boyer

Richard Beliveau

Marie-Claude Delisle

Vincent Vachon

Sylvie Giroux

Membre a labase

Christian Boyer

Résumé du colloque

Afin d'étudier le transporteur rénal du phosphate, des lapins ont été immunisés avec un peptide synthétique de 14 acides aminés fait à partir de la séquence d'un gène codant pour le transporteur rénal du phosphate du lapin (gène NaPi-1). La spécificité et l'affinité des anticorps, ainsi que la taille des protéines reliées au transport de phosphate ont été déterminées par immunoprécipitation à l'aide de membrane de polivinylidène difluorure (PVDF). L'immunobravage efficace par détection de peptide synthétique (~0.1 mM) entraîne la perte de détection de protéines de membranes à bordure en brosse (MBB) pouvant être reliées au cotransporteur Na+/Pi. Ces protéines possèdent des tailles moléculaires de 38, 66, 72, 92, 110, 176 et 222 kDa chez le bœuf, de 64 kDa chez le lapin et de 65 kDa chez le rat. Suite à une électrophorèse effectuée en absence de bêta-mercaptoéthanol (agent réducteur), on détecte une protéine de devenir 250 kDa dans les MBB de rat. La purification de ces protéines a été accomplie sur la base de leur interaction avec le peptide synthétique. Les résultats obtenus démontrent que les protéines associées au cotransporteur Na+/Pi sont présentes dans les membranes de cellules rénales de bœuf, de lapin et de rat. Une étude immunologique a été effectuée sur des cellules rénales de rat en culture; par contre, la détection est plus marquée aux niveaux laminaires. De plus, la détection de composantes majeures du peptide NaPi-1 dans les cellules de tubules proximaux de lapin est homogène aux rats comme chez le bœuf. L'adaptation de l'hypophosphatémie est associée avec une augmentation de l'expression de ces protéines. Ces résultats démontrent que des protéines peuvent avoir des rôles spécifiques dans le cotransport Na+/Pi et que ces protéines sont conservées à travers les espèces.

Contexte

Section :

Biochimie, biologie moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie, biologie moléculaire

Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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