Colloque

Caractérisation du gène ampG codant pour un transducteur de signal de l'induction de la céphalosporinase chromosomique chez Pseudomonas aeruginosa PAO1

Taimour Yousef Langaee

Ann Huletsky

Membre a labase

Taimour Yousef Langaee

Résumé du colloque

Pseudomonas aeruginosa est responsable d'environ 10% de toutes les infections causées par les bacilles à Gram négatif. Les ß-lactamines (pénicillines et céphalosporines) sont parmi les antibiotiques les plus utilisés dans le traitement des infections causées par ce pathogène. Cependant, on observe un phénomène de résistance de plus en plus important chez les patients traités avec les nouvelles ß-lactamines. La surproduction d'une ß-lactamase de classe C (céphalosporinase) est une des principales causes de résistance aux ß-lactamines chez P. aeruginosa. Chez les entérobactéries, le gène ampG codant pour une protéine transmembranaire (AmpG), agit comme une perméase essentielle à l'induction de la céphalosporinase chromosomique. Des études ont montré que des mutations inactivant AmpG sont responsables de faibles niveaux d'expression de la ß-lactamase non-inductible chez les bactéries à Gram négatif. Cependant, la présence d'un gène analogue chez P. aeruginosa n'a pas encore été démontrée. Afin de mieux comprendre le mécanisme de régulation de l'expression de cette céphalosporinase chez P. aeruginosa, nous avons tenté de démontrer la présence d'un gène analogue à ampG chez cet organisme. En utilisant deux oligonucléotides dégénérés, dérivés de la séquence de régions conservées chez les protéines AmpG actuellement connues, nous avons amplifié par PCR un fragment de 380 pb. L'analyse de la séquence nucléotidique du fragment PCR obtenu a démontré des pourcentages de similarité de 67% et 64% avec les gènes ampG d'Escherichia coli et Haemophilus influenzae respectivement. Une banque d'ADN génomique de P. aeruginosa PAO1 construite dans le phage lambda-ZAP Express a été criblée en utilisant le fragment PCR comme sonde. Le gène ampG a été localisé sur un fragment d'ADN chromosomique Xho I de 3.2 kb. Afin de compléter la séquence du gène ampG, nous avons cloné le fragment de 3.2 kb dans le vecteur pBGS19+. La présence d'un gène analogue à ampG chez P. aeruginosa suggère l'existence d'un mécanisme commun de régulation de l'expression de cette céphalosporinase chez P. aeruginosa et chez les entérobactéries.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université de Trois-Rivières

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Titre du colloque :

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