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Caractérisation du produit du gène v-rel

KG

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Kenneth Garson

Résumé du colloque

Le virus de la réticulo-endothéliose, souche T (REV-T) est un rétrovirus des volailles hautement oncogénique qui contient l'oncogène v-rel. Cet oncogène a été exprimé dans des cellules hétérologues afin d'étudier le mécanisme de transformation. V-rel a été placé sous le contrôle du promoteur tardif de SV40 pour permettre la production de la protéine virale dans les cellules Cos 1. Des anticorps produits contre la protéine de 60 kd exprimée ont été utilisés afin d'identifier le produit de v-rel par un test immuno-enzymatique ("Western blot"). Le produit exprimé dans les cellules Cos 1 a le même poids moléculaire (55KDa) que la protéine exprimée dans les cellules de moelle osseuse de poulet transformées avec REV-T (CBMC). Afin de préparer un meilleur anticorps, 60 de la région neutrale de v-rel a été clonée dans le puc 19 dans le cadre de lecture du gène lac Z. La protéine hybride a été purifiée et utilisée pour immuniser les lapins. Les anticorps produits suite à cette immunisation sont actuellement employés pour étudier l'activité kinase du produit du gène rel. À la suite des modifications de ce gène et son introduction in vitro, les produits obtenus seront soumis à cette même analyse enzymatique.

Contexte

host icon Hôte : Université d’Ottawa

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