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Caractérisation du RNA synthétisé in vitro à partir du DNA alkylé

MG

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M. Guertin

Résumé du colloque

L'alkylation du DNA diminue son activité matrice pour la transcription. Pour mieux comprendre le mécanisme de cette diminution, nous avons caractérisé le RNA produit in vitro à partir du DNA alkylé. Le DNA purifié du bactériophage T7 est alkylé par le méthanesulfonate d'éthyle ou le méthanesulfonate de méthyle. Ce DNA est ensuite employé comme matrice pour la synthèse in vitro du RNA. Après extraction, le RNA est analysé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Bien que la dose d'alkylant nécessaire pour réduire l'activité matrice du DNA soit semblable pour les deux agents alkylants, leurs mécanismes d'action semblent très différents. La méthylation du DNA provoque un raccourcissement des chaînes de l'acide nucléique et l'éthylation une modification des bases. La synthèse du RNA dans ce dernier cas est diminuée à un degré qui dépend de la concentration de l'alkylant, et une élongation plus lente des chaînes de RNA.

Contexte

host icon Hôte : Université Laval

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