Colloque

Caractérisation d'une nouvelle enzyme de restriction LcrI produite par Lactococcus cremoris G2

Barbara Karska-Wysocki

Margaret Mamet-Bratley

Georges Szatmari

Geneviève Beauregard

Membre a labase

Barbara Karska-Wysocki

Résumé du colloque

Peu de bactéries lactiques ont été analysées pour la présence d'endonucléases de restriction du type II. Ces enzymes reconnaissent des séquences nucléotidiques spécifiques et clivent le DNA bicaténaire à ces sites. Nous avons découvert une telle activité de restriction dans Lactococcus cremoris G2, une souche isolée d'un levain mixte utilisé dans la fabrication du fromage Cheddar. La présence d'activité de restriction était décelée par l'action des extraits bactériens sur différents substrats tels les DNA des phages λ ou φX174 ou encore le DNA du plasmide pBR322. L'analyse par électrophorèse des patrons de fragmentation de ces différents substrats démontrait la présence d'un seul site de clivage dans les DNA de λ et de pBR322 et d'aucun site de clivage dans le DNA de φX174. La comparaison de ces patrons avec ceux des enzymes de restriction connues a révélé que cette nouvelle activité, que nous avons nommée LcrI, donne le même patron que celui produit par l'enzyme NheI. Nous avons de plus confirmé, par un test de clonage, que le site de clivage de LcrI est identique à celui de NheI. LcrI est donc le premier isoschizomère connu de NheI. Nous comptons appliquer ces mêmes protocoles à d'autres souches lactiques industrielles dans le but d'étendre l'inventaire des enzymes de restriction chez ces bactéries.

Contexte

Section :

Biotechnologie, biophysique

Thème du colloque :

Biotechnologie, biophysique

Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

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