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Résumé de la communication
Le granulovirus de Choristoneura fumiferana (ChfuGV) est un entomopathogène qui joue un rôle dans le contrôle des populations de la tordeuse des bourgeons de l’épinette, principal ravageur des forêts de conifères. Les études du génome et du protéome du virus sont nécessaires pour une meilleure compréhension du rôle des protéines virales dans l’infection associée au granulovirus. Ce projet consiste en la caractérisation moléculaire et immunobiologique de la protéine p10 du ChfuGV. La p10 des baculovirus possède une structure fibreuse et est impliquée dans la morphogenèse du corps d’inclusion. Ainsi, le gène codant pour la p10 a été repêché au niveau du fragment G BamHI du génome du ChfuGV et ensuite séquencé. L’analyse de la séquence obtenue a permis de confirmer l’identité du gène. La protéine recombinante p10 a été produite dans les cellules E. coli M15 (pREP4) en utilisant le vecteur d’expression pQE32 et purifiée sur des colonnes Ni-NTA. La protéine recombinante a été utilisée pour l’immunisation de souris Balb/c. Parallèlement, le gène codant pour la p10 a été cloné dans le vecteur eucaryote pcDNA3. Le plasmide pcDNA3-p10 a été utilisé lors des immunisations génétiques de souris Balb/c. La cinétique de production et la spécificité des anticorps anti-p10 sont évaluées en utilisant les techniques ELISA et Western blot. Les anticorps anti-p10 seront utilisés pour l’immunolocalisation de la p10 à différents niveaux du cycle de réplication du virus en utilisant des coupes de tissus de larves infectés par le ChfuGV. Ces résultats devraient nous confirmer la structure de la p10 et son implication dans la morphogenèse des corps d’inclusion.
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