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Résumé de la communication
L’infection associée au granulovirus ChfuGV, des larves de Choristoreura fumiferana fait intervenir plusieurs protéines virales dont la majorité sont peu caractérisées. Parmis ces protéines, la p35 des baculovirus semble jouer un rôle majeur en inhibant les mécanismes apoptotiques nécessaires à la régulation du développement et de l’homéostasie tissulaire de l’hôte. Ce projet consiste en la caractérisation moléculaire et immunobiologique de la p35 de ChfuGV. Ainsi, le gène codant pour la p35 a été initialement identifié et amplifié par PCR, cloné dans le vecteur pCR2.1 puis séquencé. Ce gène sera ensuite transféré dans un vecteur d’expression procaryote, pQE32, pour la production de la p35 recombinante. Cette protéine recombinante sera utilisée pour immuniser des souris Balb/C. Parallèlement, le gène codant pour p35 a été transféré dans le vecteur eucaryote pCDNA qui sera utilisé lors de l’immunisation génétique de souris Balb/C. Ces deux approches d’immunisation devraient nous assurer la production d’anticorps polyclonaux anti-p35. La cinétique de production et la spécificité des anticorps anti-p35 seront confirmées par les techniques ELISA et Western Blot. Les anticorps ainsi produits seront utilisés pour l’immunolocalisation de la p35 dans les coupes de tissus de larves infectées. Une connaissance accrue des protéines du ChfuGV impliquées dans le processus anti-apoptotique contribuerait à une meilleure compréhension du phénomène co-évolutif de l’interaction granulovirus/insecte.
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