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Caractérisations des hépatocytes de truite arc-en-ciel par sondes fluorescentes et cytométrie en flux pour l'évaluation toxicologique

Michel Marion
Francine Denizeau
MM

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Michel Marion

Résumé du colloque

En surveillance environnementale, l'utilisation de poissons comme espèces sentinelles croît rapidement. Les cellules de foie de poisson isolées représentent un modèle métabolique intéressant pour l'évaluation toxicologique et la mise en évidence de biomarqueurs utiles. Le présent travail vise la caractérisation d'hépatocytes de truite-arc-en ciel à l'aide de sondes fluorescentes et de la cytométrie en flux (CMF) permettant d'étudier le calcium in situ et d'obtenir rapidement la "signature biochimique". La viabilité cellulaire, les niveaux des thiols, incluant le glutathion (GSH), ainsi que l'activité du système cytochrome P-450 ont été évalués sur des hépatocytes isolés et maintenus en culture pendant 4 jours. Une analyse en double diffusion par CMF permet de distinguer la sous-population des cellules vivantes. Des observations concordent avec celles obtenues par iodure de propidium, un colorant fluorescent d'exclusion. Pour sa part, la distribution des ions calcium suggère que la structure interne des cellules est bien maintenue en culture. Les mesures avec le diacétate de chlorométhylfluorescéine, qui détecte les thiols, montrent que ceux-ci sont à peu près constants dans le temps. Le dosage du GSH par fluorimétrie fournit des résultats analogues. Enfin, l'activité cytochrome P-450, suivie par le cyanocoumarin, apparaît également stable. Ces résultats démontrent le potentiel de la CMF pour l'étude des hépatocytes de poisson par analyse individuelle et confirment la stabilité en toxicologie biochimique cellulaire.

Contexte

Section :
Pharmacologie et toxicologie
news icon Thème du colloque :
Pharmacologie et toxicologie
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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