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Résumé du colloque
En chromatographie liquide à haute pression sur échangeur d'ions, les protéines ou peptides absorbés sont habituellement élués par un gradient de pH et/ou un gradient salin. Cependant, dans plusieurs cas, ces deux techniques d'élution ne permettent pas une résolution suffisante pour séparer certaines protéines possédant des propriétés physico-chimiques semblables. La chromatographie par déplacement d'ampholytes en HPLC permet d'augmenter cette résolution. Cette technique consiste en l'établissement d'un gradient de pH naturel (sans champ électrique) par la simple application sur échangeur d'ions d'une solution d'ampholytes de la gamme de pH désirée. L'utilisation de cette méthode en HPLC sur échangeur d'ions et en variant les conditions chromatographiques, il est possible d'obtenir un gradient de pH naturel et d'en modifier la pente et l'étendue selon les besoins de la séparation effectuée. Le couplage de la haute résolution de la chromatographie par déplacement d'ampholytes avec celle de l'échange d'ions en HPLC, offre de nouvelles possibilités pour une résolution rapide et efficace des protéines possédant des propriétés physico-chimiques voisines.
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