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Cinétique de production des ribonucléotides par Kluyveromyces fragilis

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Marcio A. F. Belem

Résumé du colloque

L'utilisation des 5'-ribonucléotides pour intensifier la saveur des aliments, tels que saucisson, hamburger, sauces et jus de fruits, est de plus en plus envisagée par l'industrie agro-alimentaire. Ainsi, nous avons proposé un procédé pour fermenter du lactosérum par une souche de Kluyveromyces fragilis, afin de produire les ribonucléotides. Ceux-ci sont obtenus après l'extraction du ARN de la levure et l'hydrolyse partielle des molécules de l'ARN. La production des ribonucléotides donc dépend autant de la concentration en ARN dans la cellule que de l'activité des enzymes intracellulaires. Cinq milieux de culture contenant 5% (p/v) du lactosérum déshydraté, 1% de l'extrait de levure, 0.4% du (NH4)2SO4 et 0.2% du KH2PO4 ont été fermentés à 30°C, pH 4.5, sous agitation à 300 rpm. Les fermentations ont été arrêtées après 14-20-24-30-36 h, ce qui correspond aux temps des phases exponentielle, stationnaire et vieillissement de la croissance microbienne. La biomasse a été récupérée par centrifugation (30.000xg, 15 min), diluée (1:2) dans un tampon 0.1M KH2PO4, pH 7.5, et traitée à 50°C pendant 24 h, dans un réacteur d'un litre, sous agitation (150 rpm). Les autolysats obtenus ont ainsi été centrifugés (10.000xg, 15 min) et le surnageant a été dosé par RP-HPLC (Waters 286) avec une cologne Novopak C18 et un détecteur UV (254nm), sous un débit de 1.0 ml/min de l'eau/acetonitrile/PIC A, 30 min, pour déterminer la concentration des ribonucléotides.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biotechnologie, biophysique
host icon Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

Biotechnologie, biophysique

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