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Cinétique du phosphoprotéome des cellules épithéliales de rat suite à l'inhibition de la voie ERK

MC

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Mathieu Courcelles

Résumé de la communication

Les kinases MAP font partie d’une famille de protéines régulant de nombreuses fonctions cellulaires telles la prolifération, la différentiation et la survie cellulaire. ERK1 et ERK2 sont d’importants membres de cette famille et leur dérégulation est fréquemment associée avec des pathologies humaines comme le cancer, le diabète et les maladies cardiovasculaires. Dans cette étude, nous profitons des progrès de la phosphoprotéomique quantitative et de la bio-informatique pour identifier les substrats potentiels de ERK1/2. Ces derniers seront déterminés à partir de profils cinétiques de phosphorylation suite à la stimulation de la voie ERK et l’inhibition pharmacologique des isoformes des kinases MEK. Pour quantifier les changements dans la signalisation de la voie ERK, les cellules épithéliales intestinales de rat (IEC6) furent stimulées au sérum fœtal de bœuf pendant 0, 5, 16, 60 minutes. Elles ont été préalablement traitées avec le PD184352, un inhibiteur sélectif de MEK1/2. Les extraits des protéines cytosoliques et nucléaires furent ensuite digérés à la trypsine et déposés sur une colonne de dioxyde de titane pour en enrichir les phosphopeptides. Les peptides ont été séparés par chromatographie bidimensionnelle (SCX et C18) couplée a un spectromètre de masse LTQ-Orbitrap. Les données quantitatives ont été traitées avec MassSense, un outil développé par notre groupe, et les spectres MS/MS ont été corrélés avec le moteur de recherche Mascot et la base de données IPI de rat.

Résumé du colloque

Plusieurs conférenciers de marque participeront à ce colloque, et nous coordonnons avec le réseau national Canadien de protéomique l’attribution d’un prix annuel qui pourrait être décerné lors de cet événement.

Contexte

host icon Hôte : Université de Montréal

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