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Clonage des différents isoformes en 3' de l'ADNc d'une protéine humaine du centrosome, la ninéine

Marie-Claude Choquette
Eveline De Medicis
Gilles Boire
MC

Membre a labase

Marie-Claude Choquette

Résumé de la communication

Le clone 43 MB a été isolé à partir d'une librairie d'ADNc leucocytaire humaine (lambdaTriplEx, Clontech). Sa séquence de 2 kb (GenBank AF187272) est nouvelle et homologue à l'extrémité 3' de l'ADNc de la ninéine de souris (GenBank U40342). La séquence protéique correspondante possède 70 % d'homologie avec la ninéine de souris. L'extrémité 3' du clone 43MB se termine par une séquence nouvelle, non-homologue à la ninéine de souris et ne comporte pas de polyA. L'extrémité 3' de l'ADNc de la ninéine humaine a donc été recherchée par extension d'amorce sur deux librairies Marathon (Clontech) de leucocytes et de placenta. Les PCR ont été clonés dans pBluescript et les colonies ont été criblées par hybridation avec 43MB. Une série de clones donne une isoforme de 43MB, plus longue que le clone de départ. Une autre série de clones donne une isoforme plus courte et différente de 43MB. Ces résultats supportent l'hypothèse de deux isoformes obtenues par épissage alternatif du dernier exon, et confirment la présence de deux protéines de 245 et 249 kD mises en évidence par immunoblot (Mack et al. Arthritis and Rheumatism, 1998).

Contexte

Section :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
news icon Domaine de la communication :
Biochimie, biologies cellulaire et moléculaire
host icon Hôte : Université de Montréal

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Thème du communication :

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