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Clonage des gènes de Pseudomonas sp. CBS-3 spécifiant la dégradation de l'acide 4-chlorobenzoïque (4CBA)

Pierre Savard
Luc Peloquin
Michel Sylvestre
PS

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Pierre Savard

Résumé du colloque

La dégradation bactérienne du 4-chlorophényle (4CB) nécessite deux ensembles de gènes distincts. Un premier qui convertit le 4CB en 4CBA et un second qui minéralise le 4CBA. Afin de cloner les gènes de Pseudomonas sp. CBS-3 spécifiant la dégradation du 4CBA, nous avons d'abord construit un cosmid à large spectre d'hôte, pPSB42A, vecteur dérivé des plasmides pTC9 et RSF1010. Les sites uniques de restriction sont BamHI, ClaI, HindIII, SalI et SstI. Ce vecteur est amplifiable au chloramphénicol chez E. coli et est mobilisé efficacement vers Pseudomonas sp. CBS-3. Le cosmid pPSB42A avec la banque de gènes de Pseudomonas CBS-3 a été construit chez Satt. Ce cosmid recombinant est ensuite mobilisé vers Pseudomonas putida. Un fragment d'ADN de 5 Kpb portant les gènes impliqués dans la dégradation du 4CBA a été isolé et sa carte de restriction a été dressée. Nous avons démontré par hybridation Southern la nature chromosomique de ces gènes. Les résultats de clonage démontrent qu'une large partie de ce fragment d'ADN est nécessaire pour la dégradation du 4CBA.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Montréal

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Titre du colloque :

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