Colloque

Clonage du gène de la 4-chlorobenzoate 4-hydroxylase de Pseudomonas sp. CBS-3

Pierre Savard

Luc Peloquin

Michel Sylvestre

Robert Masse

Membre a labase

Pierre Savard

Résumé du colloque

La dégradation bactérienne du 4-chlorophénylène (4CB) nécessite deux ensembles de gènes distincts. Un premier qui convertit le 4CB en 4-chlorobenzoate (4CBA), et un second qui minéralise le 4CBA. Il n'existe aucune souche naturelle possédant à la fois ces deux ensembles de gènes. Le but ultime du présent projet est d'obtenir une souche bactérienne minéralisant complètement le 4CB. Dans une première étape, nous voulons cloner le gène de la 4-chlorobenzoate 4-hydroxylase de Pseudomonas sp. CBS-3. Cette enzyme catalyse l'oxydation du noyau benzénique pour générer le 4-hydroxybenzoate. Ce dernier composé est facilement dégradé par plusieurs souches bactériennes. Le clonage de la 4-chlorobenzoate 4-hydroxylase se compose de 4 étapes: 1) la construction d'un cosmide bi-fonctionnel dérivé de pW279 et PHC79; 2) la construction d'une banque de gènes de Pseudomonas sp. CBS-3 chez Escherichia coli; 3) la mobilisation des cosmides recombinants vers Pseudomonas; 4) la sélection des clones 4CBA+ en déterminant la libération de chlore dans le milieu.

Contexte

Section :

Biochimie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biochimie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université du Québec à Chicoutimi

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