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Clonage du gène de la métallothionéine chez Xenopus laevis

Élise Saint-Jacques
Carl Séguin
ÉS

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Élise Saint-Jacques

Résumé du colloque

Les métallothionéines (MTs) forment une classe de protéines riches en cystéines qui lient plusieurs métaux lourds (Cu2+, Cd2+, Zn2+, Hg2+, etc.). Ces protéines existent chez plusieurs organismes, des bactéries aux primates. La classe des amphibiens est intéressante pour l'étude de l'induction des MTs en réponse à des situations physiologiques chez les vertébrés. Nous avons entrepris de cloner le gène de la MT chez le Xénopé par hybridation différentielle. Une génothèque d'ADN complémentaire (ADNc) préparée à partir de l'ARNm de foie d'animaux injectés au CdCl2 sera criblée en duplicata avec deux sondes d'ADNc préparées aussi à partir d'ARNm de foie. Dans un cas, la sonde sera préparée à partir des animaux injectés et dans l'autre, à partir d'animaux contrôles. La génothèque, construite dans le vecteur λgt11, contient 2x105 clones primaires dont 95% sont des recombinants. Cette génothèque a été amplifiée dans la souche Y1088 d'E. coli et la longueur moyenne des inserts est de 1kb. Les clones retenus seront criblés avec l'ADNc du gène de la MT d'une souris. Le clone sélectionné sera séquencé et utilisé comme sonde pour cloner le gène de la MT chez cet amphibien.

Contexte

Section :
Biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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