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Clonage du gène de la métallothionéine de l'amphibien Ambystoma mexicanum

JG

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Johane Guay

Résumé du colloque

Les métallothionéines (MT) sont des protéines ubiquitaires de faibles poids moléculaires, riches en cystéine, qui lient des métaux lourds tels que le cuivre, le zinc et le cadmium. Le gène des MTs ou leurs ADN complémentaires ont été clonés chez les primates, les rongeurs, les insectes, l'oursin de mer, la levure et les champignons. La classe des amphibiens est intéressante pour comprendre le rôle biologique des MTs à cause de sa situation phylogénique parmi les vertébrés. Une génothèque génomique a été construite avec l'ADN génomique sanguin de l'urodèle Ambystoma mexicanum. L'ADN a été digéré avec l'enzyme Hind III, séparé par électrophorèse et les fragments de 2 à 6 kb ont été extraits du gel et clonés dans le vecteur pAM18. Trente-cinq mille recombinants ont été criblés avec une sonde contenant des MRE et MTs de divers clones, pAMT1 et pAMT2, hybrides avec des séquences dans ces conditions de basse stringence. Les cartes de restriction de chacun de ces deux clones indiquent qu'ils sont différents, suggérant que le gène de la MT de l'axolotl s'intègre sur au moins deux sites dans le génome. Les sous-fragments de ces clones hybrides ont été clonés et sous-clonés dans le phage M13 en vue d'être séquencés.

Contexte

news icon Thème du colloque :
Biologie moléculaire
host icon Hôte : Université de Moncton

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Titre du colloque :

Biologie moléculaire

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