Colloque

Clonage du gène de la protéase du virus VIH-1 dans un plasmide d'expression eucaryote

Philippe Maugueret

Jocelyn Yelle

Gilles Sauvé

Membre a labase

Philippe Maugueret

Résumé du colloque

La protéase du VIH-1 constitue une importante cible pour le développement de nouveaux médicaments pour le traitement des sidéens. Cette enzyme assure la maturation des virions après l'étape de bourgeonnement à la fin du cycle de réplication. Dans le but d'une part, d'évaluer l'efficacité d'inhibiteurs potentiels de l'enzyme dans un système se rapprochant des conditions rencontrées in vivo et d'autre part, d'étudier la toxicité de la protéase dans la cellule, nous avons effectué le clonage du gène codant pour l'enzyme dans un plasmide d'expression eucaryote. Nous avons choisi le plasmide pMSG (Pharmacia) qui porte un promoteur inductible en amont du site de clonage multiple. Le gène protéase a été obtenu à partir du vecteur pPR-1 et modifié à ses extrémités par PCR pour introduire des sites Nhe I, Sal I, BamH I et EcoR I. Un premier clonage EcoR I-BamH I du gène modifié a été fait dans le plasmide pT7T3a18 (GIBCO/BRL). Par la suite, l'insert a été clivé par Nhe I et Sal I et sous-cloné dans pMSG pour donner l'orientation voulue. Cette construction sera introduite dans des cellules eucaryotes pour analyser l'expression du gène.

Contexte

Section :

Biologie cellulaire et moléculaire

Thème du colloque :

Biologie cellulaire et moléculaire

Hôte : Université McGill

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Titre du colloque :

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