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Clônage du gène hemA de Escherichia coli K12

AS

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Alexandre Sasarman

Résumé du colloque

Les porphyrines sont des constituantes de base des organismes vivants. Leurs dérivés jouent un rôle essentiel dans des processus fondamentaux tels la photosynthèse, la respiration, la synthèse des acides nucléiques, etc. La première étape dans la biosynthèse des porphyrines est la synthèse de l'acide 5-aminolévulinique (5-ALA). Cette synthèse est effectuée par la 5-ALA synthase (5-ALAS) qui est codée par le gène hemA. Ainsi, le gène hemA est responsable de la synthèse du premier intermédiaire des voies métaboliques qui conduisent à la chlorophylle, l'hème, la vitamine B12 etc. Il est donc évident que les principaux mécanismes de régulations de voies respectives interviennent à son niveau. Ces voies sont connues de façon très approximative. Pour améliorer nos connaissances dans ce domaine, le clônage du gène hemA est indispensable. Ceci a été effectué à partir d'un plasmide ColV+, porteur du gène hemA. Le plasmide ColV+ a été introduit dans des souches non-lysogènes par l'aide du phage Mu (L. Peloquin coll. en préparation). Le gène hemA a été transféré dans le plasmide hybride pBR322. Le plasmide hybride pBR322::hemA est relativement instable. En dépit de son instabilité, un mutant porteur du plasmide hybride produit 2-3 fois plus de 5-ALAS que la souche sauvage.

Contexte

host icon Hôte : Université Laval

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