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Clonage du gène humain de la dystonia musculorum

Gratien Dalpé
Arthur Brown
Martine Mathieu
Rashmi Kothary
GD

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Gratien Dalpé

Résumé du colloque

La dystonia musculorum (dt) est une maladie neurodégénérative récessive affectant les neurones sensitifs de la moelle épinière de souris. Afin de cloner le gène responsable de cette maladie, nous avons isolé des fragments d'ADN génomique englobant 75 kb du locus dt de souris. À l'intérieur de cette région, nous avons identifié un fragment d'ADN conservé chez le rat, le hamster, le lapin et l'humain. À l'aide de ce fragment, nous avons cloné un fragment génomique humain, qui a une similarité de 82% avec la sonde du souris sur 175 pb. En utilisant des cellules hybrides d'humain-hamster, nous avons déterminé que le fragment humain est situé sur le chromosome 6. Dans le but de cloner toute la région du locus homologue de l'humain, nous avons entamé une marche chromosomique et la sélection d'un YAC (yeast artificial chromosome) contenant le fragment humain correspondant au locus dt de la souris. Notre marche chromosomique nous a permis de cloner 3 larges lambda contenant de l'ADN génomique englobant une région de 30 kb. Nous voulons caractériser une grande région du locus humain, afin d'identifier les fragments conservés entre l'humain et la souris, et s'en servir pour cloner le cADN dt de ce dernier. Aussi, nous avons commencé la localisation exacte du locus humain sur le chromosome 6, par la technique de FISH (fluorescence in situ hybridization). Cette analyse va nous permettre d'identifier génétiquement les maladies humaines liées génétiquement à une mutation du locus dt humain.

Contexte

Section :
Biochimie, biologie moléculaire
news icon Thème du colloque :
Biochimie, biologie moléculaire
host icon Hôte : Université du Québec à Montréal

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Titre du colloque :

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